Introducción: Los ensayos ELISA para la detección de anticuerpos al VIH han alcanzado una amplia difusión en todo el mundo para la pesquisa de la infección. La utilización de péptidos sintéticos en estos ensayos se ha incrementado debido a su alta reproducibilidad y pureza, lo que le confiere una alta especificidad y sensibilidad a los mismos. Objetivo: Realizar un estudio de la antigenicidad y especificidad de péptidos sintéticos monoméricos y quiméricos representativos de las glicoproteínas de la transmembrana (gp41) y de la envoltura (gp120) del VIH-1 y de la transmembrana (gp36) del VIH-2. Materiales y métodos: Los péptidos más antigénicos y específicos se combinaron a diferentes concentraciones, en la fase sólida, con la proteína recombinante p24rec, para obtener una mezcla permitiera la detección de anticuerpos específicos al VIH 1/2. En este estudio se utilizó un ensayo UltramicroELISA (UMELISA) indirecto empleando muestras de seropositivos al VIH-1 y al VIH-2. La especificidad se evaluó con muestras de donantes de sangre del Banco de Sangre Provincial de La Habana, y muestras positivas a diferentes agentes infecciosos. Resultados: El péptido sintético monomérico gp36 (5) y el quimérico Q (C-15) resultaron ser los más antigénicos. De las mezclas evaluadas, la mayor sensibilidad y especificidad se obtuvo con la que presentó el Q (C-15) a 2 µg/mL, el Q (C21-1) a 2,5 µg/mL, el gp36 (5) a 3 µg/mL y la p24rec a 1 µg/mL). Conclusiones: Los resultados demuestran la gran utilidad de estos péptidos sintéticos para la detección de anticuerpos específicos al VIH-1/2 en la certificación de la sangre y la vigilancia epidemiológica.